Vectores de ADN

Vectores pUT mini-Tn5

Sistema pUT mini-Tn5

Los mini-Tn5 son elementos móviles capaces de transponerse desde un plásmido al cromosoma bacteriano. La actividad transposasa necesaria está codificada por el gen tnp*, presente en cis en el plásmido aunque externo al elemento mini-Tn5. Los vectores pUT mini-Tn5 son utilizados para insertar fragmentos de ADN en el cromosoma bacteriano, clonando previamente dichos fragmentos dentro de la región mini-Tn5. Debido a la pérdida del gen tnp* después de la inserción, los minitransposones son integrados en el cromosoma y heredados de manera estable. Los diferentes vectores pUT mini-Tn5 pueden utilizarse en inserciones secuenciales, siendo posible la construcción de cepas con distintos fragmentos integrados.

Ventajas:

  • Inserción fácil y estable del ADN heterólogo en el cromosoma de la cepa de interés, después de unas simples manipulaciones genéticas.
  • Amplio rango del tamaño del fragmento insertado.
  • Posibilidad de múltiples inserciones en una misma cepa.
  • Modificación fácil del vector de clonación.
  • Uso de dianas para enzimas de restricción de corte poco frecuente como NotI y SfiI.
  • Amplio rango de cepas receptoras Gram negativas. 

Algunas de las aplicaciones más comunes de los vectores pUT mini-Tn5 son:

  • Clonación e inserción estable del fragmento clonado.
  • Mutagénesisinsercional.
  • Ensayos con promotores.
  • Generación de fenotipos condicionales y mutaciones no polares.
  • Análisis de terminadores transcripcionales.
  • Aplicaciones medioambientales: etiquetado con genes marcadores para la monitorización de puesta en libertad de microorganismos y/o regulación transcripcional en el medio ambiente.

Bibliografía:

Kits pUT mini-Tn5

Kit pUT mini-Tn5 Cm:

  • pUT mini-Tn5 Cm, 2 μ
  • E.coli DH5a lpir, stab.
  • E.coli S17-1 lpir, stab.
  • E.coli DH5α(pRK2013), stab.
  • Solución TSS, 1.5ml.

Kit pUT mini-Tn5 Km:

  • pUT mini-Tn5 Km, 2 μ
  • E.coli DH5a lpir, stab.
  • E.coli S17-1 lpir, stab.
  • E.coli DH5a(pRK2073), stab.
  • Solución TSS, 1.5ml.

Kit pUT mini-Tn5 Sm/Sp:

  • pUT mini-Tn5 Sm/Sp, 2 μ
  • E.coli DH5alpir, stab.
  • E.coli S17-1 lpir, stab.
  • E.coli DH5a(pRK2013), stab.
  • Solución TSS, 1.5ml.

Kit pUT mini-Tn5 Tc:

  • pUT mini-Tn5 Tc, 2 μ
  • E.coli DH5alpir, stab.
  • E.coli S17-1 lpir, stab.
  • E.coli DH5a(pRK2013), stab.
  • Solución TSS, 1.5ml.

Pack PANC-1 mini-Tn5:

  • pUT mini-Tn5 Km, 2 μ
  • pUT mini-Tn5 Cm, 2 μ
  • pUT mini-Tn5 Sm/Sp, 2 μ
  • pUT mini-Tn5 Tc, 2 μ

Pack PANC-1plus mini-Tn5:

  • pUT mini-Tn5 Km, 2 μ
  • pUT mini-Tn5 Cm, 2 μ
  • pUT mini-Tn5 Sm/Sp, 2 μ
  • pUT mini-Tn5 Tc, 2 μ
  • E.coli DH5alpir, stab.
  • E.coli S17-1 lpir, stab.
  • E.coli DH5a(pRK2013), stab.
  • E.coli DH5a(pRK2073), stab.
  • Solución TSS, 1.5ml.

Kit pUT mini-Tn5Tel:

  • pUT mini-Tn5 Tel, 2 μ
  • Telurito de potasio, 100mg.
  • E.coli DH5alpir, stab.
  • E.coli S17-1 lpir, stab.
  • E.coli DH5a(pRK2013), stab.
  • Solución TSS, 1.5ml.

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RS-3308     Tetraciclina     25g
RS-3309     Tetraciclina     100g
RS-3222     Telurito de Potasio     1 g
RS-3311     Telurito de Potasio     5g