Cepas de bacterias

E. coli DH5α λpir

La cepa de E. coli DH5α λpir expresa el gen pir a partir de una copia lisógena del fago λpir, y está diseñada para la propagación de plásmidos con el origen de replicación R6K, como los vectores pUT mini-Tn5. Para transferir estos plásmidos desde la cepa donadora DH5α λpir a la cepa receptora es necesario generar un acoplamiento triparental con una cepa helper como E. coli DH5α(pRK2013) (ver cepas Helper de E. coli). El genotipo de la cepa es sup E44, (lacU169 (N80lacZ)M15), recA1, endA1, hsdR17, thi-1, gyrA96, relA1, fago lisógenoλpir.

E. coli S17-1 λpir

La cepa de E. coli S17-1 λpir expresa el gen pir a partir de una copia lisógena del fago λpir, y está diseñada para la propagación de plásmidos con el origen de replicación R6K, como los vectores pUTmini-Tn5. Esta cepa tiene, integradas en el cromosoma, funciones RP4 de transferencia por conjugación que permiten la transferencia directa de los plásmidos a la cepa receptora, sin necesidad de llevar a cabo un acoplamiento triparental con una cepa helper.

El genotipo de la cepa es TpRSmRrecA, thi, pro, hsdR-M+RP4: 2-Tc:Mu: Km Tn7, fago lisógenoλpir.

E. coli SM10 λpir

La cepa de E. coli SM10 λpir expresa el gen pir a partir de una copia lisógena del fago λpir, y está diseñada para la propagación de plásmidos con el origen de replicación R6K, como los vectores pUTmini-Tn5. Esta cepa tiene, integradas en el cromosoma, funciones RP4 de transferencia por conjugación que permiten la transferencia directa de los plásmidos a la cepa receptora, sin necesidad de llevar a cabo un acoplamiento triparental con una cepa Helper. El genotipo de la cepa es KmR, thi-1, thr, leu, tonA, lacY, supE, recA::RP4-2-Tc::Mu, fago lisógenoλpir.

E. coli DH5a (pRK2013)

La cepa de E. coli DH5α(pRK2013) contiene el plásmido helper pRK2013, que provee de los genes tra y mob necesarios para la transferencia del ADN clonado en plásmidos pUT mini-Tn5, desde una célula hospedadora carente de esos genes. El genotipo de la cepa es supE44, )lacU169(N80lacZ)M15), recA1, endA1, hsdR17, thi-1, gyrA96, relA1, pRK2013 (KmR oriColE1 RK2-Mob+ RK2-Tra+)

E. coli DH5a (pRK2073)

La cepa de E. coli DH5α(pRK2073) contiene el plásmido helper pRK2073, que provee de los genes tra y mob necesarios para la transferencia del ADN clonado en plásmidos pUT mini-Tn5, desde una célula hospedadora carente de estos genes. El genotipo de la cepa es supE44, )lacU169(N80lacZ)M15), recA1, endA1, hsdR17, thi-1, gyrA96, relA1, pRK2073 (StR oriColE1 RK2-Mob+ RK2-Tra+)