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Producción de Anticuerpos Monoclonales

  • El servicio de Producción de Anticuerpos Monoclonales estándar de Biomedal se basa en la línea de ratón Balb-c. El servicio incluye las siguientes fases:

    1. PRELIMINAR: Discusión sobre los detalles del proyecto (sistema de escrutinio, criterio de selección, requisitos especiales), planning y preparación del trabajo.
    2. INMUNIZACIÓN, FUSIÓN CELULAR, SELECCIÓN Y SCREENING: Immunización de al menos 2 ratones (Balb-C), cultivo de células de mieloma de la línea SP2, fusión celular, selección y screening.
    3. CLONACIÓN: Clonación, screening y cultivo de los hibridomas positivos. El cliente recibirá el sobrenadante de cultivo necesario por cada clon positivo para testarlo por medio de su propio sistema.
    4. CRIOPRESERVACIÓN: Se criopreservarán tres viales por cada clon estable positivo. Los crioviales y 10 ml del sobrenadante del cultivo de cada clon positivo serán enviados al cliente. Además se podrán almacenar otros dos crioviales en nuestras instalaciones hasta que el cliente lo estime oportuno (con un mínimo coste adicional).
    5. CARACTERIZACIÓN DE LOS CLONES SELECCIONADOS: Se determinará el isotipo Ig y se realizará un test de deteción de Micoplasma. Se emitirá el certificado correspondiente.
    6. EL CLIENTE PAGARÁ SOLO EN CASO DE ÉXITO: A partir de la 3ª fase se conocerá si se han conseguido clones positivos contra el inmunógeno. El cliente solo pagará si se supera la 3ª fase satisfactoriamente. En este caso el cliente deberá pagar el 50% del coste total del servicio. La segunda parte del pago se realizará a la entrega del producto.
    7. DERECHOS DEL CLIENTE: El cliente adquiere la posesión de todos los clones positivos y recibirá una completa documentación de todo el trabajo realizado para la producción del anticuerpo monoclonal.
    8. OTROS SERVICIOS: Ofrecemos el servicio de producción del anticuerpo alegido a gran escala, purificación del mismo y conjugación con diversos fluorocromos y enzimas.

     

  • Protocolo de Producción de Anticuerpos Monoclonales:

    • FASE I: Inmunización
    • El periodo de inmunización puede variar entre 30 y 90 días según necesidades. La proteína será entregada por el cliente. Si es necesaria la síntesis del péptido por nuestra parte, se aplicará un coste adicional.
    • FASE II: Fusión, screening y selección
    • En esta fase se incluye la generación de un cultivo primario, la selección en medio HAT y el screening. La fusión de las células del bazo con células de mieloma de la línea celular Sp2/0, se realizará por medio de nuestro esquema estándar. Todos los cultivos primarios donde exista crecimiento y producción de Ig serán testados por el cliente.
    • FASE III: Clonación y screening
    • Todos los clones positivos serán utilizados para futuras subclonaciones. La clonación se llevará a cabo por el método de dilución límite. Después de cada clonación se hará un screening de los positivos. El cliente recibe 1 ml de sobrenadante de cada clon con crecimiento para su testado.
    • FASE IV: Segunda clonación, screening, estabilización y criopreservación
    • En esta fase se llevan a cabo los pasos necesarios para obtener los clones puros, incluído el testado por el cliente. Al final obtendremos tres crioviales y 10 ml de cultivo por cada clon positivo. Biomedal almacenará dos crioviales de cada clon durante algunos meses que solo serán utilizados bajo autorización del cliente.
    • FASE V: Caracterización de los clones seleccionados

     

    Todos los clones seleccionados se enviarán previamente testado para:

    • Determinación de la subclase Ig.
    • Test de Micoplasma.

    Se emitirá un certificado de resultados.

     

    Condiciones y Garantías:
    Biomedal garantiza un mínimo de 3 clones positivos productores de Ig contra el inmunógeno utilizado. El cliente será el que teste los clones.
    FASE VI: (opcional)

     

    Purificación:
    El tipo de purificación varía según los requerimientos y necesidades del cliente:

    • Precipitación con sulfato de amonio.
    • Purificación con Proteína A o G.
    • Purificación por afinidad con antígenos.
    • Purificación por gel de filtración.

     

    Conjugación:
    El anticuerpo producido se podrá conjugar con fluorocromos o enzimas.

  • Asunto

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    En caso de que quiera realizar un pedido directamente, por favor, indíquenos aquí los servicios que desea:

    SE-3446 Servicio de conjugación de anticuerpo conSE-3447 Servicio de conjugación de anticuerpo con R-PESE-3448 Servicio de conjugación de anticuerpo con APCSE-3449 Servicio de conjugación de anticuerpo con HRPSE-3451 Producción usando hibridomasSE-3454 Criopreservación de Hibridomas

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