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Sistema pUT mini-Tn5
Los mini-Tn5 son elementos móviles capaces de transponerse desde un plásmido al cromosoma bacteriano. La actividad transposasa necesaria está codificada por el gen tnp*, presente en cis en el plásmido aunque externo al elemento mini-Tn5. Los vectores pUT mini-Tn5 son utilizados para insertar fragmentos de ADN en el cromosoma bacteriano, clonando previamente dichos fragmentos dentro de la región mini-Tn5. Debido a la pérdida del gen tnp* después de la inserción, los minitransposones son integrados en el cromosoma y heredados de manera estable. Los diferentes vectores pUT mini-Tn5 pueden utilizarse en inserciones secuenciales, siendo posible la construcción de cepas con distintos fragmentos integrados.
Ventajas:
- Inserción fácil y estable del ADN heterólogo en el cromosoma de la cepa de interés, después de unas simples manipulaciones genéticas.
- Amplio rango del tamaño del fragmento insertado.
- Posibilidad de múltiples inserciones en una misma cepa.
- Easy modification of the cloning vector.
- Uso de dianas para enzimas de restricción de corte poco frecuente como NotI y SfiI.
- Amplio rango de cepas receptoras Gram negativas.
Algunas de las aplicaciones más comunes de los vectores pUT mini-Tn5 son:
- Clonación e inserción estable del fragmento clonado.
- Mutagénesis insercional.
- Ensayos con promotores.
- Generación de fenotipos condicionales y mutaciones no polares.
- Análisis de terminadores transcripcionales.
- Aplicaciones medioambientales: etiquetado con genes marcadores para la monitorización de puesta en libertad de microorganismos y/o regulación transcripcional en el medio ambiente.
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Cepas relacionadas BS-3233 E. coli DH5a lpir Stab BS-3234 E. coli S17-1 lpir Stab BS-3236 E. coli DH5a (pRK2013) Stab BS-3263 E. coli DH5a (pRK2073) Stab KT-4694 E. coli DH5a Competent Cells Set 12 viales de 0.2 ml and pUC18Not Reactivos relacionados RS-3215 Solución TSS – 20 reactions 1.5 ml RS-3216 Solución TSS – 100 reactions 1.5 ml x 5 RS-3445 Telurito de Potasio 100mg RS-3222 Telurito de Potasio 1g RS-3311 Telurito de Potasio 5g RS-3217 Ampicillin 5 g RS-3305 Ampicillin 25g RS-3306 Ampicillin 100g RS-3218 Chloramphenicol 5 g RS-3307 Chloramphenicol 100g RS-3315 Erythromycin 5g RS-3327 Erythromycin 100g RS-3328 Gentamycin 1g RS-3329 Gentamycin 5g RS-3219 Kanamycin 5 g RS-3221 Streptomycin 5 g RS-3310 Streptomycin 25g RS-3220 Tetracycline 5 g RS-3308 Tetracycline 25g RS-3309 Tetracycline 100g RS-3222 Telurito de Potasio 1 g RS-3311 Telurito de Potasio 5g -