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LYTAG Sistema de Expresión y Purificación

  • LYTAG (*) es una nueva generación de productos para la expresión y la purificación de proteínas de fusión en E. coli. El sistema está basado en un tag de purificación por cromatografía de afinidad, LYTAG, que  interacciona específicamente con la resina LYTRAP, un soporte cromatográfico simple y económico.

    LYTAG consiste en una secuencia corta de aminoácidos (136 aa; 15.21 KDa) e incorpora una secuencia polipeptídica estructurada en alfa-hélice que actúa como elemento espaciador entre el dominio de unión a colina y la proteína de interés, reduciendo la posible interferencia estructural entre ambas regiones y facilitando, si es necesaria, la separación del tag mediante digestión con enteroquinasa, al favorecer el acceso de esta endopeptidasa a su diana de corte.

    LYTAG viene integrado en una nueva generación de vectores de expresión de tecnología CASCADE™. Estos nuevos vectores (pALEX2a, b y c) incorporan un promotor Pm mutante con menor actividad basal, permitiendo así un mayor control sobre la expresión. Las mejoras efectuadas en los nuevos pALEX2, así como el nuevo tag aumentan la solubilidad de la proteína purificada. Además, los pALEX2 permiten fusionar el polipéptido que va a ser expresado, directamente al sitio de corte de enteroquinasa, posibilitando su recuperación sin aminoácidos no deseados en el extremo amino, tras la digestión con la endopeptidasa.

    (*)LYTAG es una patente solicitada por la Universidad Miguel Hernández (Elche, España). Biomedal tiene licencia de explotación en exclusiva. Los usuarios de universidades y centros públicos tienen licencia automática para su uso en investigación. Para otros fines por favor, contacte con nosotros.

    Principales ventajas del Sistema de purificación LYTAG:

    • Sistema altamente regulado.
    • Purificación en un solo paso con un rendimiento de más de un 95% de proteína recombinante.
    • Resina simple, económica y reutilizable.
    • Mayor solubilidad que en sistemas competidores habituales.
    • Menor cantidad de impurezas.
    • Facilidad de eliminación del tag por digestión con enteroquinasa sin residuos de aminoácidos indeseados.
    • Compatible con todos los tampones comunes.
    • La proteína purificada puede ser fijada de nuevo a la matriz de afinidad.
    • Los tampones de elución no interfieren en la cuantificación de la proteína.
    • No son necesarias modificaciones covalentes para una inmovilización eficiente.
  • LYTAG Sistema de Expresión y Purificación de Proteínas:
    •    Saliclat 1M (Inductor), 25ml
    •    pALEX2a, 8μg
    •    pALEX2b, 8μg
    •    pALEX2c, 8μg
    •    Resina LYTRAP, 30ml
    •    Cloruro de Colina (3M), 20ml

    Kit LYTAG SpinPlus
    •    Saliclat 1M (Inductor), 25ml
    •    pALEX2a, 8μg
    •    pALEX2b, 8μg
    •    pALEX2c, 8μg
    •    pALEX-Ca-GFP (plásmido de control de expresión y purificación, 8μg)
    •    E. Coli REG 12, stab
    •    Solución TSS, 1.5ml
    •    PROLYSE (para la disrupción celular), 25ml
    •    Cloruro de Colina (3M), 20ml
    •    Anticuerpos Anti-LYTAG, 100 μl
    •    LYTRAP Spin Columns, 20 unidades
    •    pALEX2c LacZ, 8μg

  • AB-3238 Anticuerpo anti-LYTAG 100 µl
    RS-3302 Resina LYTRAP 30 ml
    RS-3316 Resina LYTRAP 250 ml
    RS-3319 LYTRAP Spin Columns 10 unidades
    RS-3320 LYTRAP Spin Columns 25 unidades
    RS-3321 LYTRAP Spin columns 100 unidades
    RS-3322 Columnas de Purificación (2.5 ml) 1 unidades
    RS-3396 Columnas de Purificación (2.5 ml) 10 unidades
    RS-3414 Columnas de Purificación (5 ml) 1 unidades
    RS-3415 Columnas de Purificación (10 ml) 1 unidad
    RS-3247 Salcilato (1M) 25 ml
    RS-3287 CLoruro de Colina (3M) 20 ml
    RS-3286 C-LYTRAP – F 10 g
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    KT-4662 LYTAG SpinPlus Kit 1 KitKT-3246 LYTAG Protein Expression & Purification System 1 kit

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